Ejemplo de ácidos nucleicos recombinantes en la naturaleza

Una estrategia para el antagonismo intermicrobiano a menudo utilizado por Proteobacteria es el sistema de secreción de tipo VI (T6SS) genéticamente dependiente del contacto para matar a los competidores adyacentes. Mientras que el ADN liberado por la muerte de T6 se puede adquirir horizontalmente, y luego utilizados para competir con las células vecinas. 

Utilizando Vibrio cholerae naturalmente transformable, proporcionamos el primer apoyo directo para que los genes T6 se intercambien horizontalmente (por ejemplo, de competidores muertos) y se despliegan funcionalmente para competir con las células vecinas.

Ejemplo de ADN recombinante artificial

T: Evolución de la respesta inmune contra las proteínas recombinantes (TcpA, TcpB y FlaA) como una vacuna candidata de subunidad contra el cólera

O: Evaluar las respuestas inmunes frente a las proteínas recombinantes TcpA, TcpB y FlaA o combinación de ellas

G: Genes TcpA, TcpB y FlaA

ER: No especifica

EL: T4 ADN ligasa

V:  Se utilizaron vectores de expresión procariota pET32a (Novagene) y pGEX4T1.

CR: MNCs (células mononucleares) 

MTG: Transfección

MIC: PCR, cultivo celular, análisis de Immunoblot, evaluación de las respuestas inmunes contra proteínas recombinantes

Bibliografía

1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28743812/

2.  1025-0298-vac-29-03-136.pdf (sld.cu)

3. Expression in Saccharomyces boulardii of recombinant Toxin-coregulated pilus A subunit (TcpA) of Vibrio cholerae O1 (sld.cu)

Hibridación en la anafilaxia

El análisis de hibridación in situ mostró que los sitios de reacción de PCA tratados con oligonucleótidos de TGF-beta1 anti sentido no mostraron niveles detectables de ARNm de TGF-beta1 y L-histidina descarboxilasa después de la estimulación con IgE anti-DNP. En la hibridación mucho de los casos las alergias se relacionan con la  con la necesidad de indicar una placa o brazalete de alerta médica sobre la infección. 

Bibliografía:

Polysorbates, Biotherapeutics, and Anaphylaxis: A Review - BioProcess InternationalBioProcess International (bioprocessintl.com)

PCR (Reacción en cadena polimerasa)-Anafilaxia

Tema: La PCR en el análisis de alérgenos en tiempo real (RT-PCR).

Objetivos: Evaluar el rendimiento diagnóstico de RT-PCR, midiendo su efecto.

Tipo de muestra: Extracción de sangre.

Tipo de ácido nucleico: ADN (en este caso ADN virus)

Gen o secuencia por amplificar: Gen KARS bajo el método de amplificación de secuencias específicas de ADN gracias al ADN polimerasa. 

Tipo de PCR: RT- PCR  (tiempo real) y RT- PCR múltiple.

Visualización: sus etapas

Extracción de ácidos nucleicos →    retrotranscripción en caso de virus ADN (la enzima genera una cadena de ADN a partir de ARN) →   amplificación y detección al mismo tiempo de copias del virus (dependerá del número de ciclos).  

 

   Hay cambios que provocan variación estructural en el aminoácido 542 de la proteína LysRS y ya no sintetiza, activando exageradamente a los mastocitos en presencia de un alérgeno.

La metilación de ADN es el principal mecanismo epigenético que controla la expresión de genes propios de las células Th1, la expresión de IFNG e IL-4 en células T naive se asocia a hiperacetilación de histonas en IFNG e IL-4, y la mayor metilación del ADN en genes de citoquinas a Th1 hace viable el desarrollo de células Th2.

Bibliografía:

1) Epigenética en enfermedades alérgicas y asma (scielo.cl)

2)La PCR en el análisis de alérgenos: una cuestión polémica - Food & Feed Analysis (r-biopharm.com)

3) Identificado un nuevo mecanismo molecular relacionado con la gravedad de la anafilaxia (clinicbarcelona.org)

Alteración en la epigenómica en la anafilaxia

Los mecanismos epigenéticos a más de estar ligados a histonas, se modifican químicamente como la metilación de ADN, etc. Distintos factores pueden actuar provocando modificaciones que afecten la expresión del gen sin variar secuencia de ADN.

Entre los mecanismos más importantes están:

1. Metilaciones de dinucleótidos CpG en el ADN

2. Modificar colas de histonas 

3. Los microARN reducen estabilidad o eficiencia de la traducción de mARn

Bibliografía:

1. Epigenética en enfermedades alérgicas y asma (scielo.cl)

2. revchilanestv50n01-04.pdf (revistachilenadeanestesia.cl)